細胞培養(yǎng)中的常用試劑

細胞培養(yǎng)中的常用試劑

動物細胞或組織離開體內(nèi)到體外進行培養(yǎng)時，需要為其提供生長所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)以及為了讓細胞在體外能夠更好的生長所需要的各種試劑。本期就簡單向大家介紹一下細胞在培養(yǎng)過程中所用到的一些試劑成分以及它們的作用。

01 細胞培養(yǎng)基成分

(1).基礎(chǔ)培養(yǎng)基  

常見的基礎(chǔ)培養(yǎng)基主要有MEM，DMEM，RPMI，主要提供包含葡萄糖、氨基酸、水、微量元素，碳酸氫鈉等的緩沖體系。

● 谷氨酰胺    

是細胞生長所必須的必需氨基酸，參與蛋白質(zhì)合成和核酸代謝。

● 酚紅指示劑

一種常用的酸堿指示劑，在酸性時顯黃色，中性時顯紅色，堿性時為紫色，酚紅在培養(yǎng)基中作為PH值的指示劑。

● 碳酸鹽/PH緩沖系統(tǒng)

一種生理PH緩沖系統(tǒng)，由于細胞代謝過程中產(chǎn)酸，培養(yǎng)基中的HCO3-會逐漸被消耗掉，所以需及時補充CO2才能維持PH維持在一定范圍內(nèi)。

(2).動物血清

在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入2%-20%血清成為完全培養(yǎng)基，血清不僅可以為細胞提供生長所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)，還含有生長因子、激素、微量元素和離子等參與細胞代謝的重要成分。

(3).抗生素

為了防止細胞在培養(yǎng)過程被污染，通常會向完全培養(yǎng)基中添加青霉素-鏈霉素混合液，即雙抗，青霉素主要對革蘭氏陽性菌有效，鏈霉素對許多革蘭氏陰性菌有效。

02 胰蛋白酶-EDTA

胰蛋白酶可使細胞間的蛋白質(zhì)水解進而細胞離散開，EDTA是一種化學(xué)螯合劑，毒性小，對貼壁細胞有離散作用，兩者聯(lián)合使用，分散細胞的效力更高，這一步被稱為消化細胞。對于不同細胞而言，對于胰酶使用時的溫度、時間、濃度都有不同的要求，消化不足，細胞不能被消化下來，消化過度會造成細胞損傷。因培養(yǎng)基中的血清可以降低胰酶的活性，通常使用完全培養(yǎng)基來終止細胞消化。

03 PBS緩沖液

PBS是磷酸緩沖鹽溶液，具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜PH緩沖作用，一般用來清洗細胞，可維持細胞滲透壓。

04 二甲基亞砜(DMSO)

一種重要的滲透型細胞保護劑，是細胞凍存液中的重要成分。細胞在凍存過程中，DMSO能快速穿透細胞膜進入細胞內(nèi)，降低冰點、延緩凍存過程、提高細胞內(nèi)離子濃度，減少細胞內(nèi)冰晶的形成，可減少細胞損傷。

05 支原體抑制劑

支原體污染在細胞培養(yǎng)過程中常見的一種污染源，然而在污染初期可以使用支原體抑制劑來消除細胞液中的支原體，使實驗可以繼續(xù)進行下去。

06 臺盼藍染料

一種檢測細胞膜完整性常用的生物染色試劑。死細胞由于細胞膜的完整性喪失，通透性增加，細胞可被臺盼藍染成藍色，而活細胞因為有完整地細胞膜，能夠排斥臺盼藍進入細胞內(nèi)，因此不會被染色。在顯微鏡下通過細胞顏色可以辨別活死細胞，方便活細胞計數(shù)。

捷美JIMEI

細胞培養(yǎng)不僅需要上述的這些試劑，還需要適宜的生長環(huán)境（溫度、濕度、CO2濃度），我們一直致力于細胞培養(yǎng)設(shè)備的研發(fā)，工藝成熟、設(shè)備參數(shù)穩(wěn)定，歡迎咨詢！

（發(fā)布于：2022-08-08）